差速离心法原理是:物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时,可得:F=Mω2r或者F=V.D.ω2r上述表明:被离心物质所受到的离心力与该物质的质量、体积、密度、离心角速度以及旋转半径呈正比关系。
离心力越大,被离心物质沉降得越快。在离心过程中,被离心物质还要克服浮力和摩擦力的阻碍作用。浮力F}和摩擦力F}}分别由下式表示:F’=V.D’.ω2r(2)F’’=f dr/dt(3)其中D}为溶液密度,f为摩擦系数,dr/dt为沉降速度。
在一定条件下,可有:F=F’+F’’V.D.ω2r=V.D’ω2r+f.dr/dt dr/dt=Vω2r(D-D’)/f(4)式(4)表明,沉降速度与被离心物质的体积、密度差呈正比,与f成反比。若以S表示单位力场(ω2r=1)下的沉降速度,则S=V(D-D’)/f S即为沉降系数。
沉降系数对于生物大分子来说,多数在(1~500)×10-13秒之间。为应用方便起见,人们规定1×10-13秒为一个单位(或称1S)。一般单纯的蛋白质在1~20S之间,较大核酸分子在4~100S之间,更大的亚细胞结构在30~500S之间。
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